3 УДК 578.2 НОВЫЙ ФИТОВИРУСНЫЙ ВЕКТОР ДЛЯ СУПЕРЭКСПРЕССИИ ЦЕЛЕВЫХ БЕЛКОВ В РАСТЕНИИ Е.В. <...> Путляев, А.А. Смирнов, Е.А. Лазарева, Г.В. Клинк, О.В. Карпова, И.Г. Атабеков (кафедра вирусологии; e-mail: putlegor@mail.ru) Ранее нами был получен новый вирусный вектор на основе генома вируса мозаики альтернантеры штамма MU, ген целевого белка в составе которого находился под контролем двух субгеномных промоторов. <...> Вирусный вектор обеспечивал суперэкспрессию белка оболочки и ряда целевых белков медицинского назначения в листьях Nicotiana benthamiana. <...> В настоящей работе с целью увеличения продукции целевого белка вирусный вектор был модифицирован и ген белка оболочки поставлен под контроль трех субгеномных промоторов. <...> Полученный вирусный вектор (AltMV triple1) также обеспечивал суперэкспрессию целевого белка в агроинъецированных листьях. <...> Проведено сравнение эффективности экспрессии целевого белка в листьях Nicotiana benthamiana, трансформированных вирусными векторами, содержащими два и три субгеномных промотора потексвирусов. <...> Для экспрессии различных целевых белков в растении чаще всего используют вирусные векторы на основе геномов вирусов растений. <...> Целью данной работы было создание нового вирусного вектора на основе генома вируса мозаики альтернантеры для суперэкспрессии целевых белков в растении. <...> Материалы и методы В данной работе использовались штаммы Escherichia coli XL-1 Blue (Stratagene, USA) и Agrobacterium tumefaciens GV3101 из коллекции кафедры вирусологии биологического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова. <...> В работе использовались эндонуклеазы рестрикции фирмы “Сибэнзим” (Россия), ДНК лигаза фага T4 фирмы “Ферментас” (Литва) и наборы реактивов Encyclo PCR kit и Mint universal cDNA synthesis kit фирмы “Евроген” (Россия). <...> Полученный продукт был клонирован в p(AltMV-double) по сайтам узнавания эндонуклеазами рестрикции ApaI и SpeI. <...> Для получения конструкции p(AltMV-triple2) была проведена ПЦР на матрице p(AltMV-double) с парой праймеров Al2012/Al2025 (gtatcaatggaaacttaaccgttcagaggttaataaagtgattcgtctttggg). <...> Полученный продукт (PCR3) использовался <...>