«АБСОЛЮТНЫЙ» КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ УЧЕТ КЛЕТОК АРХЕЙ И БАКТЕРИЙ В ПОЧВЕ (60,00 руб.)

40 БИОЛОГИЯ ПОЧВ УДК 579.631.46:427.2 «АБСОЛЮТНЫЙ» КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ УЧЕТ КЛЕТОК АРХЕЙ И БАКТЕРИЙ В ПОЧВЕ* О.А. Андреева, Н.А. Манучарова, А.Л. Степанов, П.А.Кожевин Показана возможность применения метода последовательного исчерпывания для определения «абсолютной» численности популяций Bacteria и Archaea в почве на осно ве данных количественного учета для in situгибридизации с рРНКспецифичными флюоресцентно мечеными олигонуклеотидными зондами (FISH). <...> Введение В экологии микроорганизмов особое внима ние уделяется разработке методов, позволяющих наиболее полно определять их численность в при родных местообитаниях, включая почву. <...> Все клас сические методы количественного учета микроор ганизмов, как известно, являются относительными, т.е. при их применении выявляется и учитывается лишь некоторая часть объектов. <...> Повысить полно ту учета можно путем подбора способов предва рительной подготовки образцов для десорбции клеток и дезагрегирования микроколоний, однако такое решение не является универсальным и пред полагает необходимость оптимизации для конкрет ных объектов и местообитаний. <...> В этом случае проводится серия стандартных манипуляций по последовательному изъятию объектов из одного и того же образ ца почвы с учетом удаленных в каждом «отлове» клеток. <...> В ходе каждого очередного цикла к вы явленным ранее объектам прибавляются новые, что позволяет рассчитать показатели «абсолютной» численности. <...> Эффективность метода доказана для стандартных задач как общего количественного учета, так и учета конкретных видовых и штаммо вых популяций. <...> В настоящей работе представлена проверка воз можности применения определения «абсолютной» численности при количественном учете объектов современными молекулярногенетическими мето дами на примере in situгибридизации с рРНК специфичными флюоресцентно мечеными олиго нуклеотидными зондами (FISH). <...> Объекты и методы исследования В качестве объекта <...>